W 1 semestr II 2007, Wykłady - stare
[ Pobierz całość w formacie PDF ]
Wykład 1 Podstawowe metody inżynierii genetycznej Joanna Łanuszewska lanuszewska@wp.pl Badanie DNA • Cięcie cząsteczek DNA na fragmenty • Rozdział cząsteczek różniących się masą molekularną • Badanie składu nukleotydowego • Rozdział cząsteczek różniących się składem nukleotydowym • Znakowanie cząsteczek DNA • Szukanie podobnych sekwencji • Powielanie interesujących fragmentów • Odczytywanie sekwencji nukleotydów • Badanie funkcji fragmentów Cięcie cząsteczek DNA na fragmenty Rozbijanie ultradźwiękami (ultrasonikacja ) Trawienie nukleazami Nukleazy - endo- i egzonukleazy: DNazy swoiste dla podwójno- i pojedynczoniciowych cząsteczek, nieswoiste względem sekwencji (DNaza I, nukleaza mikrokokalna, egzonukleaza III) - restryktazy (enzymy restrykcyjne) Specyficzność nukleaz Tylko endonukleazy restrykcyjne, które przecinają DNA specyficznie względem sekwencji, zapewniają powtarzalność cięcia DNA na fragmenty. Enzymy restrykcyjne • Są produkowane w komórkach bakteryjnych • Powstały jako swoisty „system immunologiczny bakterii” • Każdy enzym rozpoznaje i przecina określoną sekwencję nukleotydową • Sekwencje rozpoznawane są palindromami • Długości sekwencji rozpoznawanych: od 4 do kilkunastu par zasad [ Pobierz całość w formacie PDF ] |